摘要
糖尿病视网膜病变是成年人致盲的重要原因，其特点是血管细胞进行性丧失，血管间连接溶解缓慢，从而导致血管渗漏和视网膜水肿。疾病后期以炎性细胞浸润、组织破坏和新生血管形成为特征。在这里，我们确定可溶性环氧化物水解酶(sEH)是一种关键酶，通过生成来源于二十二碳六烯酸的二醇二羟基二十二碳五烯酸，启动周细胞损失和内皮屏障功能破坏。
研究结果
图1
图1：糖尿病小鼠和人类视网膜中sEH的表达。
a：12月龄Ins2Akita（秋田）和野生型(WT)小鼠视网膜中sEH（红色）和水通道蛋白4（AQP4;绿色）的表达。
b：视网膜sEH表达的时程。
c：小鼠视网膜中sEH活性。
d：无糖尿病视网膜病变（非DR，n=6）、轻度非增殖性糖尿病视网膜病变(NPDR，n=7)或重度NPDR(n=6)患者视网膜中的sEH（红色）、谷氨酰胺合成酶（GS；绿色）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP；蓝色）和DAPI（白色）表达。
e、f：在无糖尿病视网膜病变(n=14)或糖尿病视网膜病变(DR,n=17)个体的玻璃体液中。
g：19,20-EDP和19,20-DHDP切片中GFAP(e)和sEH(f)的定量表达。
h：溶剂或sEH抑制剂(sEH-I)处理的12月龄小鼠视网膜19,20-EDP和19,20-DHDP水平。比例尺，50μm。n=5(b)或6(a，c，h)生物独立样本/组。数据为通过双因素ANOVA(b)、Student双侧t检验(c，g)或单因素ANOVA(e，f，h)确定的平均值±sem，P值。
图2
图2：sEH抑制剂治疗对12月龄小鼠糖尿病视网膜病变的影响。
a：视网膜消化制备物；箭头标记无细胞毛细血管。
b–e：a中图像的定量视网膜形态测定；即内皮细胞(EC；b)、周细胞(PC；c)、血管外周细胞(ev-PC；d)和无细胞毛细血管（ac-Cap；e）.
f：注射后1h荧光素标记牛血清白蛋白(FITC—BSA)的荧光图像。
g：漏出的FITC–BSA的定量。野生型和Ins2Akita同窝小鼠用或不用sEH抑制剂处理后视网膜。
h：N-和VE-cadherin的表达。
i：N—cadherin（绿色）和desmin（红色）在初生血管层和第二毛细血管层中的表达。
j：视网膜血管系统中VE-cadherin的表达。比例尺，20μm。每组n=5(f-h)或6(a-e，i，j)只小鼠。数据为通过双因素ANOVA确定的平均值±sem，P值。
图3
图3：19,20-DHDP对内皮细胞通透性和周细胞迁移的影响。
a：用溶剂(0.03%DMSO)、19,20-EDP、19,20-DHDP或VEGF处理的内皮细胞中VE-cadherin的表达。箭头指示不连续的VE-cadherin模式。
b：人内皮细胞对不同分子量葡聚糖（相对于对照）的通透性。Sol，溶剂。
c：小鼠脑内皮细胞跨内皮电阻(TEER)。
d，e：内皮细胞中内化的VE-cadherin（黄色）表达。
f：内皮细胞中的表面和内化VE-cadherin，相对于对照组(Ctrl)。IP，免疫沉淀。
g：N-和VE-cadherin在内皮细胞和周细胞共培养体系中的表达。
h：用siRNA下调N-cadherin(N-si)、过表达N-cadherin(N-ov)或用19,20-EDP或19,20-DHDP处理后内皮细胞上的周细胞(PC)移动性；每组N=个细胞。
i，j：内化的N-钙粘蛋白（黄色）在人周细胞中的表达。
k：在离体视网膜整座中迁移的周细胞（箭头）。
l：从内皮细胞-周细胞共培养物中免疫沉淀出PS1与VE-和N-钙粘蛋白的结合。PS1-F，全长PS1；PS1-N，N端PS1片段。
m：VE-cadherin（绿色）,PS1（红色）和N-cadherin（蓝色）在12个月大的小鼠用溶剂或sEH抑制剂处理后的视网膜中的表达。箭头表示破坏的VE-cadherin模式。
n：内皮细胞-周细胞共培养物中PS1与胆固醇的共沉淀。
o：VE-和N-钙粘蛋白与来自内皮细胞-周细胞共培养的胆固醇共沉淀。
p：野生型和Ephx2-/-小鼠暴露于19,20-EDP(μM)或19,20-DHDP（10或μM）。PI，峰强度。比例尺，20μm。n=4(a，f–h，l，n，o)，5(i，j)，6(b，d，e)或8(c)个独立实验，或每组6个视网膜(k，m)。数据为通过双因素ANOVA(b)或单因素ANOVA(c、e、f、h、j、k)确定的平均值±sem、P值。
结论
在糖尿病小鼠视网膜和糖尿病患者的视网膜和玻璃体中，sEH的表达二羟基二十二碳五烯酸的蓄积增加。机制上，二醇靶向细胞膜改变胆固醇结合蛋白的定位，并阻止早老素1与N-钙粘蛋白和VE-钙粘蛋白的结合，从而破坏周细胞-内皮细胞相互作用和内皮细胞间连接。用一种特殊的sEH抑制剂治疗糖尿病小鼠可以防止非增殖性糖尿病视网膜病变的周细胞丢失和血管通透性增加。相反，在非糖尿病小鼠的视网膜Müller神经胶质细胞中，sEH的过度表达导致了与糖尿病小鼠视网膜病变相似的血管异常。因此，sEH表达增加是糖尿病视网膜病变发病机制中的关键决定因素，抑制sEH可以阻止疾病的进展。
DOI：10./nature
参考文献
[1].Yau,J.W.Y.etal.Globalprevalenceandmajorriskfactorsofdiabeticretinopathy.DiabetesCare35,–().
[2].Bourne,R.R.A.etal.Causesofvisionlossworldwide,–:asystematicanalysis.LancetGlob.Health1,e–e().
[3].Antonetti,D.A.,Klein,R.Gardner,T.W.Diabeticretinopathy.N.Engl.J.Med.,–().
[4].Robinson,R.,Barathi,V.A.,Chaurasia,S.S.,Wong,T.Y.Kern,T.S.Updateonanimalmodelsofdiabeticretinopathy:frommolecularapproachestomiceandhighermammals.Dis.Model.Mech.5,–().
[5].Klaassen,I.,VanNoorden,C.J.F.Schlingemann,R.O.Molecularbasisoftheinnerblood-retinalbarrieranditsbreakdownindiabeticmacularedemaandotherpathologicalconditions.Prog.Retin.EyeRes.34,19–48().
END
“
资源放送
spss统计分析软件—数据分析教程大合集，走过路过不能错过！免费学习生信的机会你不要？让你不做实验也能发文章！份完整的中标基金标书等你来收藏！这一份就够了！这些让你相见恨晚的文献检索技巧，通通都给你！主治考试必备通关宝典!
更多医学选刊、医学执考讯息
长按北京治疗白癜风病的医院复方驱虫斑鸠菊丸价格
转载请注明：http://www.shiwangmoa.com/smby/4186.html
当前位置： 视网膜病变 > 视网膜病因 > 一起来看一下糖尿病性视网膜病变的预防新方
